Определение концентрации гемоглобина

В качестве унифицированного утвержден гемиглобинцианидный метод определения гемоглобина крови. Определение гемоглобина с помощью гемометра Сали (ГС-3) может быть использовано ишь в отсутствие фотоэлектроколориметра, гемоглобинометра1 или спектрофотометра.
Метод Сали.
Принцип. Гемоглобин крови под воздействием 0, 1 н. раствора хлороводородной кислоты превращается в хлорид гематина бурого цвета, интенсивность окраски его сравнивают со стандартом.
Ход определения. В каплю взятой крови, находящуюся в углублении пластинки, вносят кончик чистого и сухого капилляра от гемометра. Плавно, без перерывов, с помощью резинового баллона насасывают кровь в капилляр до круговой метки (0, 02 мл). Уровень крови в капилляре регулируют, прикасаясь к его кончику ватой или фильтровальной бумагой. Вытирают кончик капилляра от крови и вносят его в 0, 01 н. раствор хлороводородной кислоты, находящийся в градуированной пробирке, выпуская кровь в реактив тонкой струйкой, не взмучивая жидкость. Не удаляй капилляр из пробирки, его прополаскивают 2—3 раза надосадочным прозрачным 0, 1 н. раствором хлороводородной кислоты, затем извлекают из жидкости, прикасаясь его кончиком к стенкам пробирки, выдувают остаток жидкости и выносят из пробирки. Кровь с хлороводородной кислотой немедленно смешивают, энергично встряхивая содержимое пробирки. Вследствие гемолиза эритроцитов и образования хлорида гематина жидкость буреет и становится прозрачной. Пробирку от гемометра, на которой нанесена шкала, градуированная в грамм-процентах, через 5 мин после смещения вставляют в гемометр Сали, имеющий два стандарта. Через 5 мин к испытуемой жидкости небольшими порциями прибавляют дистиллированную воду, каждый раз тщательно перемешивая жидкость с помощью стеклянной палочки. Стекающая с палочки жидкость должна полностью остаться в пробирке. В момент, когда цвет жидкости приблизится к цвету стандартов, воду начинают прибавлять осторожно, по каплям. Разведение заканчивают, как только цвет испытуемой жидкости сравняется с цветом стандартов. Цвет жидкости стандартов сравнивают при дневном освещении в проходящем свете, держа в вытянутой руке на уровне глаз. Определяют, какому делению шкалы соответствует нижний мениск жидкости. Цена деления шкалы равна 0, 2 г %. Количество гемоглобина при оформлении в бланке анализа записывают в граммах на 1 л, для чего полученные данные умножают на 10. После определения гемоглобина пробирку и капилляр промывают дистиллированной водой, высушивают, а гемометр укладывают в футляр.

Руководство к практическим занятиям по методам клинических клинических лабораторных исследований: Учеб. Пособие -4-е изд., перераб. И доп.-В.С. Ронин, Г.М. Старобинец.-М.: Медицина, 1989.-320с.